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漫谈荧光分光光度计在不同行业中的应用

 

荧光分光光度计根据不同的激发能,可不同的类型,由高速电子束激发后发射的叫电子荧光,由X射线激发而产生的X射线荧光,而化学或电化学反应引起的叫化学或电化学荧光,两种物质之间摩擦后可产生摩擦荧光,而研究最多、应用最广的是由光致发光,即由紫外光或短波长光照射后发出的荧光。

漫谈荧光分光光度计在不同行业中的应用

荧光分光光度计检测技术在DNA杂交测试、免疫检测、基因重组检测和肿瘤细胞早期诊断等方面的广泛应用,主要的用途有以下几种。

荧光检测——DNA测序

DNA测序是人类基因组测序的前提。在最近几年里,DNA序列测定在医学、分子生物学等领域得到广泛应用。荧光检测提供了比传统的同位素辐射法更安全、实用的DNA片段标记方法,可实现测序的在线计算机处理。然而由于生物背景干扰,荧光染料DNA测序的灵敏度远低于同位素标记法。近红外荧光染料的出现很好地解决了这一问题,这无论对顺序测序法还是杂交测序法都相当有意义。

荧光免疫分析

荧光免疫分析是将免疫反应的特异性和荧光技术的灵敏性相结合的一种分析方法,基本原理是将特异性抗体和抗原标记上荧光基团成为特异性试剂,与相应的抗原或抗体结合,形成抗体抗原复合物,再用荧光检测仪检测荧光的各项参数变化从而获得样品中抗体或抗原的分布、浓度等信息。

分子信标:用于基因检测的荧光杂交探针

最近发展起来的分子信标技术为核酸检测提供了新途径,它具有操作简单、灵敏度高、特异性强、可实时检测、甚至动态监测活体核酸等优点。分子信标是一种基于荧光共振能量转移现象设计的发卡型寡核糖酸探针,空间上呈茎环结构:茎的一端连接荧光分子,另一端连接猝灭分子,通过空间结构变化来改变分子信标的荧光特性,从而实现对核酸检测。

20世纪90年代初期,Thomasride等人就采用原位杂交的方法,使用组合荧光和数字成像显微镜,同时检测7种不同的DNA探针。自此以后,荧光光谱仪检测技术被用于编码识别纳米条码,让该技术又达到了更高的高度和新的突破口,为生物化学医疗检测等交叉学科的发展提供了更开阔的视野和更有效的方法。

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